Sartorius Stedim Biotech 16249 Manual

16249
Directions for Use
Stainless Steel Pressure Filter Holder
Bedienungsanleitung
Edelstahl-Druckfiltrationsgerät
80277-000-50
80277-000-50

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2

3
1. Specifications 4
2. Unpacking the Filter Holder 5
3. Cleaning and Care of the Filter Holder 6
4. How to Assemble the Filter Holder
and Insert a Membrane Filter 6
5. Sterilization of the Filter Holder 7
6. IntegrityTesting 8
7. Filtration of Liquids 9
8. Analytical Methods 10
9. Microbiological Testing 11
10. RecommendedAccessories 11
11. Spare Parts 12
The practical and simple to handle stainless steel filter
holder 16249 is, with an appropriate membrane filter in
position, suitable for many laboratory applications, e.g.
– Sterilizing filtration of tissue culture solutions
– Clarifying filtration of buffer solutions, solutions for
cell counters, orviscous products such as hydraulic
liquids, photoresists
– Pressing out of earth samples.
For small volume liquid filtration (the barrel capacity
is 200 ml) it can be connected directly to a pressure
source. Alternatively, for larger volumes of up to 5 liters
of easily filterable liquids, a pressure tank can be
inserted between the pressure source and holder.
It is standardly supplied with stainless steel hose nipples
for 10 mm tubing which can be exchanged for adapters
with an G3⁄8 threaded nut or with quickconnect fittings
(see “Recommended Accessories”).
Contents

Specifications
4
1. Specifications
Material of the
filter holder: AISI 316 stainless steel
(German standard 1.4401)
O-rings: Filter support:
Silicone O-ring, 42+3 mm
top cap:
silicone O-ring, 41+2 mm
Connectors
on the holder: Inlet and outlet: M12 +1 female thread
Fittings supplied
with the holder: Inlet and outlet: stainless steel nipples
for 10 mm hose. Other matching fittings
are listed under “Accessories”.
Sterilization: Autoclave up to 134°C – 30 min.
Sterilize with dry heat up to
180°C – 30 min., depending
on the filter used.
Appropriate
filter diameter: Membrane filter: 47 mm
Prefilter: 42 mm
Filtration area: 13 cm2
Capacity: 200 ml
Weight: 960 g
Max. operating
pressure: 1,000 kPa (10 bar)
Flow rate for
water: Typical rate at ∆p = 100 kPa
(1 bar = 14.5 psi)
200 ml/min – 0.2 µm membrane filter
600 ml/min – 0.45 µm membrane filter
1400 ml/min – 0.8 µm membrane filter

Parts supplied
5
2. Unpacking the Filter Holder
Remove the filter holder from the box.
Check the list below to make sure you have all parts
available:
Parts supplied Shown in
Fig. 1 as
1 Filling port closure No. 1
1 Top part of filter holder No. 2
2 Hose nipples No. 3
1 Silicone O-ring, 41+2 mm No. 4
1 Barrel (200 ml) No. 5
1 Locking ring No. 6
1 Silicone O-ring, 42+3 mm No. 7
1 Filter support screen, PTFE-coated No. 8
1 Underdrain screen, PTFE-coated No. 9
1 Base of the filter holder No. 10
1 Steel rod No. 11
Fig. 1
11
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
3

Cleaning
6
3. Cleaning and Care of the Filter Holder
To ensure a long in-service life and properfunctioning,
it is necessary to clean the filter holder prior to initial use
and after every filtration run. Proceed as follows:
3.1 Completely disassemble the filter holder as indicated
in the list of the parts supplied.
3.2 Use soft brushes, warm water, and a gentle,
commercially available laboratory detergent (for metal,
glass and plastic) to clean all parts. For removing stubborn
stains, dirt and other impurities, it is safe to use organic
solvents (except for the silicone O-rings).
3.3 Rinse all parts with hot water and then with
distilled water.
3.4 Dry the parts with compressed air or let them drip-dry.
Please do not use cloth or towels to dry because they may
leave lint on the filter holder.

Preparation
7
4. How to Assemble the Filter Holder and Insert
a Membrane Filter
4.1 Screw a hose nipple onto the bottom of the base.
Tighten the hose nipple using a 17 mm open-end wrench
(spanner). (Fig. 2)
4.2 Center the underdrain screen (smooth surface faceup)
on the base of the holder and place the filter support screen
on top. (Fig. 3)
4.3 Remove a membrane filter from the box using Sartorius
Stedim Biotech blunt-tipped forceps, and wet the filter
with distilled water, if the holder is to be autoclaved (see
note in step 5.1) before centering it on the filter support
screen. (Fig. 4)
If you use a prefilter, center it on top of the membrane
filter. The diameter of the prefilter may not be larger
than 42 mm.
4.4 Place a silicone O-ring (42+3 mm) on the
membrane filter or the prefilter. (Fig. 5)
4.5 Position the 200 ml barrel exactly on the base and
assemble both parts by tightening the locking ring. (Fig. 6)
4.6 Press the other silicone O-ring (41+2 mm) into the
groove on the inside of the top part of the filter holder.
(Fig. 7)
Screw the top part onto the barrel. (Fig. 8)
4.7 Now screw the other hose nipple onto the top part
using a 17 mm wrench to tighten it. (Fig. 9)
4.8 Close the filling port with the filling port closure.
(Fig. 10)
4.9 Screw the steel rod onto the top part and attach
the filter holder to a laboratory stand. (Fig. 11)

Sterilization
8
5. Sterilization of the Filter Holder
5.1 Assemble the filter holder and position a membrane
filter as described in section 4.
Important note:
Pre-wet all Sartorius Stedim Biotech Membrane Filter types
with distilled water before placing them in a filter holder
for autoclaving. (Exception: cellulose nitrate can be placed
dry in a dry filter holder.) The prefilter must be corres
pondingly wet or dry.
5.2 Cover the inlet and the outlet of the filter holder with
aluminum foil or kraft paper. (Fig. 15)
Note:
Steam must be able to permeate the fittings!
5.3 Autoclave the filter holder at 121°C and 1 bar (100 kPa)
for 30 minutes (this is possible with all appropriate
Sartorius Stedim Biotech Membrane Filters).
Cellulose acetate membrane filters, 111..., and PTFE
filters, 118..., (including glass fiber filters, 134...) can be
alternatively sterilized in a filter holder with dry heat at
180°C for 30 min. or at 160°C for 21⁄2 hours (do not wet
the filters before placing them in the filter holders). It is
also possible to sterilize them with ETO (ethylene oxide).

Integrity Testing
9
6. Integrity Testing
The integrity and the proper working condition of a
ready-to-use filtration system are tested by the bubble
point test. The bubble point is the pressure in bar (or psi)
that is required to force air through a completely wetted
membrane filter. The charac teristic bubble points given in
the catalog for Sartorius Stedim Biotech Membrane Filters
apply to water. For liquids with a different surface tension,
please allow for variations in the bubble points listed. The
GMP guidelines recommend that you perform an integrity
test before and after sterile filtration.
Procedure for Performing the Bubble Point Test:
6.1 Attach a pressure hose to the holder outlet, and
connect the other end of the hose to a pressure source
that has a pressure gauge.
6.2 Attach a length of silicone tubing that is approx.
5 cm to the hose nipple on the outlet of the filter holder,
and immerse the other end of the tubing in about 1 cm
(21⁄2 inches) of water or alcohol.
6.3 Filter a small amount of liquid in order to completely
wet the membrane filter.
6.4 Increase the pressure to 70–80% of the expected
minimum bubble point (0.2 µm, >2.9 bar (approx, 42 psi)
if you use an automatic integrity tester). Maintain this
pressure for 2–5 minutes.
Afterwards, increase the pressure every 5 seconds by
approx. 0.1 bar (1.45 psi) and observe the end of the tubing
immersed in water or alcohol. Individual bubbles that
exit from the tubing originate in the system and are not
significant for determining the bubble point. The bubble
point is not attained until bubbling occurs, or a continuous
stream of bubbles exits from the tubing. This value must
be equivalent to the bubble point specified for the type
of filter you are using.
Note: The bubble point may be somewhat higher after
the filter in the holder has been autoclaved or sterilized.
Note:
In establishing the bubble points for solutions which have
a surface tension different from that of water, determine
the bubble points for water and for the corresponding
solution in order to calculate the permissible limits for
the solution.

Filtration
10
7. Filtration of Liquids
7.1 Assemble the filter holder and insert the membrane
filter as described in section 4.
7.2 To perform a sterile filtration run, sterilize the filter
holder as described in section 5.
7.3 To integrity test the holder and membrane filter,
please follow the directions given in section 6.
7.4 Use a pressure hose to connect the filter holder to
a pressure source that has a pressure gauge.
7.5 Place a receiver flask (glass beaker, flask, bottle or
similar) under the filter holder. (Fig. 12)
7.6 Adjust the filter holder on the stand to the correct
height so that the hose nipple on the filter holder outlet
can drain inside the receiver flask (allows filtrate to be
collected without any loss). (Fig. 13)
7.7 Remove the closure from the filling port and pour
in the medium to be filtered. (Fig. 14)
7.8 Close the filling port again and apply the necessary
pressure to the medium to be filtered. At this point the
filtration process will begin.
Note:
It is recomended to work at a relatively low pressure
(0.5–1.0 bar = 7.3–14.5 psi) in order to increase the overall
volume of the liquid that can be recovered by filtration.
In any case, the operat ing pressure should be below the
bubble-point of the filter used in order to prevent air
passage upon completion of the filtration run.
7.9 Upon completion of the filtration run, shut off the
pressure supply line and carefully release pressure (slowly
open the filling port closure). Repeat the integrity test,
if necessary, as described in section 6. Afterwards clean
the filter holder as directed in section 3.

Analytical Methods
11
8. Analytical Methods
8.1 Assemble the filter holder as described in section 4.
8.2 If necessary, flush the entire filtration system free of
particles. In addition, rinse your forceps and membrane
filters to wash off any particles.
8.3 Perform the filtration run as described in section 7.
Remove the membrane filter to perform your particular
analytic procedure (microscopic, gravimetric, chemical
or other analysis).
9. Microbiological Testing
9.1 For microbiological testing, assemble the filter holder
as described under section 4, but without prefilter.
9.2 Sterilize the filter holder and perform the filtration as
described in section 5 and 7 (for this application integrity
testing is not necessary).
9.3 Upon completion of the filtration, remove the
membrane filter from the filter holder and incubate
it in liquid culture medium, on agar or on a Sartorius
Stedim Biotech Nutrient Pad.

Accessories
12
10. Recommended Accessories
O-rings of other material:
00179 Fluoroelastomer O-ring (support)
17038 PTFE-O-ring (support)
17145 Fluoroelastomer O-ring (top part)
Connectors to replace hose nipples:
17089 Ga male thread
17090 Quick connect nipple
16656 Hand-operated valve
Pressure hoses and adapters:
16803 G4 / Ga adapter
16823 PTFE pressure hose, 80 cm
Ga threaded nut at each end
16999 PTFE pressure hose, 1.5 m
Ga threaded nut on each end
6985128 Quick connect coupling
Pumps:
16617 Pressure pump, 220 V
16662 Pressure pump, 110 V
Containers for liquid:
17530 5 l Tank, Ga male thread at each end
17170 Quickconnectnipple
16863 Hose nipple
Miscellaneous:
16970 Stand
16976 Clamp holder
16625 Forceps

Spare Parts
13
11. Spare Parts (see exploded diagram)
6980178 Silicone O-ring, (support)
6980151 Filling port closure, complete with
PTFE stopper
6980180 Filter support screen, PTFE-coated
6980737 Underdrain screen, PTFE-coated
6980801 Hose nipple
6981288 Steel rod
6982005 Locking ring
6982006 Base of filter holder
6982020 Silicone O-ring (top part)
6986055 PTFE stopper for 6980151
6986083 Barrel (200 ml)
6986084 Top part of filter holder

14
6980151
6986055
6986084
6982020
6982005
6986083
6980178
6980180
6980737
6982006
6980801
6981288
6980801

Inhaltsverzeichnis
15
1. Technische Daten 16
2. Auspacken des Gerätes 17
3. Reinigen und Pflegen des Gerätes 18
4. Zusammensetzen des Gerätes und
Einlegen des Membranfilters 18
5. Sterilisation des Gerätes 20
6. Integritätsprüfung 20
7. Filtration von Flüssigkeiten 22
8. Analytische Bestimmungen 23
9. Mikrobiologische Untersuchungen 23
10. Empfehlenswertes Zubehör 24
11. Ersatzteile 25
Das Druckfiltrationsgerät 16249 wird wegen seiner
praktischen Handhabung vielseitig im Labor eingesetzt.
Die Anwendungen sind z.B.
– die Sterilfiltration von Gewebekulturlösungen,
– die Klarfiltration von Pufferlösungen, Lösungen für
Zellzählgeräte oder viskose Produkte wie Hydraulik-
flüssigkeiten oder Fotolacke,
– das Ausdrücken von Bodenproben.
Für die Filtration kleinerer Volumina (bis zu 200 ml)
kann das Gerät direkt an eine Druckquelle angeschlossen
werden. Alternativ ist das Gerät jedoch für Volumina
bis zu 5 Litern auch in Kombination mit einem Druck-
behälter einsetzbar.
Das Gerät wird serienmäßig mit Edelstahl-Oliven für
Schlauch NW 10 geliefert. Die Schlaucholiven können
gegen Adapter für einen PTFE-Druckschlauch mit Ga
Überwurfmutter oder mit Schnellverschlusskupplung
ausgetauscht werden (siehe Empfehlenswertes Zubehör).

1. Technische Daten
Gerätematerial: Edelstahl Werkstoff Nr. 1.4401
(entspricht AISI 316)
Dichtung: Filterunterstutzung:
Silikon-O-Ring, 42+3 mm
Geräteoberteil:
Silikon-O-Ring, 41+2 mm
Anschlüsse
am Gerät: Ein- und Ausgang: M 12+1
Innengewinde
Mitgelieferte
Anschlussstücke: Ein- und Ausgang:
Edelstahl-Oliven für Schlauch NW 10.
Andere passende Anschlussstücke sind
unter Zubehör aufgelistet.
Sterilisation: Autoklavieren bis 134°C–30 Min.
Trockenhitze bis 180°C–30 Min.;
abhängig vom eingesetzten Filter
passende
Filterdurch-
messer: Membranfilter: 47 mm
Vorfilter: 42 mm
Filtrationsfläche: 13 cm2
Fassungs-
vermögen: 200 ml
Gewicht: 960 g
max. zulässiger
Betriebs-
überdruck : 1000 kPa (10 bar)
Durchfluss-
leistung für
Wasser: Typische Werte bei
∆p = 100 kPa (1 bar)
200 ml/min – 0,2 µm Membranfilter
600 ml/min – 0,45 µm Membranfilter
1400 ml/min – 0,8 µm Membranfilter
16
Technische Daten

2. Auspacken des Gerätes
Entnehmen Sie das Gerät der Verpackung.
Überprüfen Sie die Vollstandigkeit der Lieferung:
Lieferumfang In der Abb. 1
1 Einfüllöffnungsverschluss Nr. 1
1 Geräteoberteil Nr. 2
2 Schlaucholiven Nr. 3
1 Silikon-O-Ring, 41 + 2 mm Nr. 4
1 Aufsatz (200 ml) Nr. 5
1 Verschlussring Nr. 6
1 Silikon-O-Ring, 42 + 3 mm Nr. 7
1 Lochblech, PTFE-beschichtet Nr. 8
1 Siebplatte, PTFE-beschichtet Nr. 9
1 Geräteunterteil Nr. 10
1 Haltestab Nr. 11
Abb. 1
17
Lieferumfang
11
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
3

3. Reinigen und Pflegen des Gerätes
Um eine lange Lebensdauer und Funktionstüchtigkeit zu
gewährleisten, ist es notwendig, das Gerät vor dem ersten
Gebrauch und nach jeder Benutzung zu reinigen.
Gehen Sie so vor:
3.1 Zerlegen Sie das Gerät in seine Einzelteile gemäß
Lieferliste.
3.2 Säubern Sie alle Teile mit warmem Wasser, schonenden
handelsüblichen Laborreinigungsmitteln (für Metall, Glas,
Kunststoff) und weichen Bürsten. Schwer zu entfernende
Verunreinigungen können unbedenklich mit organischen
Lösungsmitteln entfernt werden. Dies gilt nicht für die
Dichtungsringe.
3.3 Spülen Sie die Teile mit heißem Wasser und danach
mit destilliertem Wasser ab.
3.4 Trocknen Sie die Teile im Pressluftstrom oder an der
Luft. Bitte verwenden Sie keine Tücher wegen etwaiger
Fasernabgabe an das Gerät.
18
Reinigung

4. Zusammensetzen des Filtrationsgerätes und
Einlegen des Membranfilters
4.1 Nehmen Sie das Geräteunterteil und schrauben Sie
auf der Unterseite eine Schlaucholive ein. Ziehen Sie die
Schlaucholive mit einem 17er Maulschlüssel fest. (Abb. 2)
4.2 Legen Sie die Siebplatte (glatte Seite nach oben)
zentrisch in das Geräteunterteil ein und das Lochblech
darüber. (Abb. 3)
4.3 Nehmen Sie das Membranfilter mit Hilfe einer Sartorius
Stedim Biotech Flachpinzette aus der Verpackung und
legen Sie es trocken oder mit dest. Wasser befeuchtet
(siehe Hinweis unter Punkt 5.1) zentrisch auf das Lochblech.
(Abb. 4)
Bei Verwendung eines Vorfilters legen Sie dieses dann
anschließend zentrisch auf das Membranfilter. Der Durch-
messer des Vorfilters darf 42 mm nicht überschreiten.
4.4 Den Silikon-O-Ring (42+3 mm) legen Sie auf das
Membranfilter bzw. Vorfilter. (Abb. 5)
4.5 Setzen Sie den 200 ml Aufsatz passgenau auf das Ge-
räteunterteil und verschrauben Sie beide Teile mit Hilfe
des Verschlussringes. (Abb. 6)
4.6 Nehmen Sie nun das Geräteoberteil und drücken Sie
den 2. Silikon-O-Ring (41+2 mm) in die dafür vorgesehene
Nut. (Abb. 7) Dann verschrauben Sie das Geräteoberteil mit
dem 200 ml Aufsatz. (Abb. 8)
4.7 Schrauben Sie die 2. Schlaucholive in das Geräteober-
teil und ziehen Sie sie wieder mit einem 17er Maulschlüssel
fest. (Abb. 9)
4.8 Schließen Sie die Einfüllöffnung mit der Verschluss-
schraube. (Abb. 10)
4.9 Bringen Sie den Haltestab am Geräteoberteil an und
befestigen Sie das Gerät an einem Laborstativ. (Abb. 11)
19
Vorbereitung

5. Sterilisation des Gerätes
5.1 Zusammensetzen des Gerätes und Einlegen des
Membranfilters wie unter 4. beschrieben.
Wichtiger Hinweis:
Alle Sartorius Stedim Biotech Membranfiltertypen werden
vor dem Auto klavieren mit dest. Wasser benetzt. (Ausnah-
me: ist das Filtrationsgerät trocken, werden Zellulosenitraf-
filter trocken eingelegt). Das Vorfilter ist entsprechend dem
Membranfilter nass oder trocken einzulegen.
5.2 Versehen Sie Ein- und Ausgang des Gerätes mit
Alu-Folie oder wasserfestem Papier. (Abb. 15)
Achtung: Eine Dampfdurchlässigkeit der Anschlüsse
muss gewährleistet sein!
5.3 Das Gerät wird bei 121°C und 1 bar 30 Minuten
autoklaviert (dies ist mit allen entsprechenden Sartorius
Stedim Biotech Membranfiltern durchführbar). Membran-
filter aus Zelluloseacetat 111.., PTFE 118.. (ebenso die
Glasfaserfilter 134..) können alternativ im Filtrationsgerät
mit Trocken hitze von 180°C über 30 min. oder 160°C über
2,5 Stunden sterilisiert werden (Filter trocken einlegen).
Ethylenoxid begasung ist ebenfalls möglich.
20
Sterilisation