Sartorius stedim Microsart Combi.jet 16847-CJ User manual

85032-536-64
Combi.jet 16847-CJ
2.5 Pour the sample to be tested into the funnel. For sample
volumes < 5 ml, charge with 10 to 20 ml sterile water or physio-
logical saline. For suctioning, reopen the stopcock (“6 o’clock”),
switch on the e.jet transfer pump and switch it off again at
the end of the filtration run or close the stopcock afterwards
(“9 o’clock”).
2.6 Remove the funnel and extract the membrane filter using
a flamed forceps.
2.7 Place the membrane filter on a nutrient pad set or on an agar
culture medium and subsequently incubate in a laboratory
incubator. When placing the membrane filter on the nutrient
pad set, make sure to avoid the inclusion of any air bubbles.
The membrane filter can additionally be used for gravimetric,
optical, chemical or other analyses.
2.8 Before storing the units, please rinse them with at least 70%
alcohol and allow the system components to air-dry.
2.9 Later analysis of the colony count can be simplified by mesh
embossed on the membrane.
Note: Prefiltration
Samples that have a high content of dirt and/or insoluble solids
should be prefiltered for the detection of bacteria. The prefiltration
adapter made of stainless steel (16807) allows prefiltration to be
conducted together with the actual membrane filtration in one work
session. Attach the adapter between the stainless steel funnel and
the lower part, fill to the brim with sterile water (this is to avoid
that any air inclusions impair filtration) and install a bacteriological
prefilter 11301-050 (8 μm pore size). Any coarse particles contained
in the sample to be tested will be retained by this prefilter which
takes a load off the membrane filter lying on the stainless steel
support and allows the colonies to grow without the adverse effects
of deposits.
The prefiltration adapter can similarly be flamed.
3. Cleaning and Care of Stainless Steel Equipment
To ensure a long service-life and functionality, it is necessary to
clean the units prior to first use and after each filtration.
To do so, proceed as follows:
1. Unscrew the white coupling from the stainless steel arch.
2. Clean all parts with warm water and gentle commercially
available laboratory cleaning agents (for metal, glass, plastic)
and soft brushes.
3. Rinse off the parts with hot water and afterwards with distilled
water. Additional flushing with 70% alcohol accelerates the
drying process.
4. Dry the parts in the drying oven. For drying, please use lint-free
towels that do not release fibers into the unit.
4. Specifications:
Material: Stainless steel round arch:
Material 1.4301 (B.S. 304S31/AlSl 304)
Coupling: PVDF
Base support for membrane filter diameter 47 mm
Max. operating pressure: Vacuum max. 2 bar overpressure
Autoclaving: Max. 134°C, 30 min
Dry heat: Max. 180°C, 30 min
1. Setting up the Combi.jet System
Assemble and set up the e.jet transfer pump according to the
operating instructions and equip it with tubing to drain off the
filtrate (When doing so, pay attention to the flow direction
indicated by the arrow on the black pump head!).
Now connect the outlet of Combi.jet by simply inserting the
white coupling into the hose barb on the Microsart®e.jet pump
(166MP-3).
2. Filtration
Stainless steel stopcocks on the lower parts allow the vacuum to
be switched on and off independently for each individual filtration
adapter, thereby minimizing the risk of secondary contamination.
The stainless steel supports serving as filter supports ensure that
residue or microbes are distributed evenly across the membrane
filter surface.
2.1 All parts of the system that come into contact with the sample
and filter membrane should be sterile. A variety of options are
available, depending on the material:
a) Autoclaving (stainless steel, glass and polycarbonates):
Assemble the units together so that a filter membrane is
securely clamped between the lower part and the funnel. Note
that the filter should not be clamped so firmly that steam is
prevented from entering into the clamp.
Setting the Two-way Stopcock to “6 O’clock”. Cover the inlets
and outlets with aluminum foil and autoclave in accordance with
the specifications for the system components. After sterilization,
assemble the system securely back together and connect it to the
other system components.
Setting the Two-way Stopcock to “9 O’clock”.
a) Flaming (stainless steel only): This saves long waits in between
the individual filtration runs and will be described in detail
in the following.
2.2 Clean your laboratory bench and disinfect it with alcohol or
a commercially available disinfectant.
2.3 Set up your sterile culture media, e.g. nutrient pad sets in Petri
dishes or, alternately, agar in Petri dishes. Wet the nutrient pad
sets with 3.0–3.5 ml of sterile distilled or demineralized water.
For this purpose, we recommend our dosing syringe (16685-2)
with pre-installed sterile Minisart®(17597-K).
2.4 Place a Bunsen burner and a glass with some alcohol with
a forceps in it next to the autoclaved filtration unit.
a) Place the sterile-packaged membrane filters in easily accessible
proximity.
b) Switch on the e.jet transfer pump and remove the funnel.
c) Flame the stainless steel support with the Bunsen burner.
To do so, open the stopcock (“6 o’clock”) and use a vacuum to
draw the flame through the support. Afterwards, re-close the
stopcock (“9 o’clock”).
d) Place the funnel back on to the lower part.
e) To speed up the cooling down of the filter unit and simplify
membrane filter insertion, rinse the unit with sterile water
(e.g. using a dosing syringe and an attached sterile Minisart®).
To suction off the water, open the stopcock (“6 o’clock”)
and close again (“9 o’clock”).
f) Sterilize the forceps briefly over the flame and take the sterile
membrane filter (if applicable, with the yellow guard) out of its
packaging. Using one hand, remove the funnel from the lower
part of the unit and place the membrane filter (with the mesh
and/or yellow guard pointing up) in the middle of the support.
g) If the membrane filter is equipped with a yellow guard,
remove it before assembling the unit onto the upper part or
funnel. Place the funnel back into the lower part of the unit.
Typical Construction: Microsart®e.jet pump (166MP-3) with Combi.jet manifold (16847-CJ) and pre-installed 100-ml stainless steel funnels

Sartorius Stedim Biotech GmbH
August-Spindler-Strasse 11
37079 Goettingen, Germany
Phone [phone]
Fax [phone]
www.sartorius-stedim.com
Specifications subject to change
without notice. Printed and copyrighted
by Sartorius Stedim Biotech GmbH
Publication No.: SL-6164-a10021
Ver. 02 | 2010
Combi.jet 16847-CJ
2.5 Gießen Sie die zu untersuchende Probe in den Trichter ein.
Bei Probevolumina unter 5 ml, sind 10 bis 20 ml steriles Wasser
oder physiologische Kochsalzlösung vorzulegen. Zum Absaugen
den Hahn wieder öffnen („6 Uhr“) die e.jet Transfer Pumpe ein-
schalten und nach Ende der Filtration wieder ausschalten bzw.
den Hahn danach schließen („9 Uhr“).
2.6 Nehmen Sie den Trichter ab und entnehmen Sie das Membran-
filter mit abgeflammter Pinzette.
2.7 Das Membranfilter wird auf eine Nährkartonscheibe oder auf
einen Agarnährboden aufgelegt und anschließend im Brut-
schrank inkubiert. Beim Auflegen des Membranfilters auf die
Nährkartonscheibe ist darauf zu achten, dass keine Luftblasen
eingeschlossen werden.
Weiterhin kann das Membranfilter zu gravimetrischen,
optischen, chemischen oder anderen Auswertungen verwendet
werden.
2.8 Zur Aufbewahrung der Geräte spülen Sie diese bitte mit mind.
70% Alkohol und lassen die Systembestandteile an der Luft
trocknen.
2.9 Die spätere Auswertung der Koloniezahl wird durch das aufge-
druckte Gitternetz auf der Membran vereinfacht.
Hinweis: Vorfiltration
Proben, die einen hohen Gehalt an Schmutz bzw. unlöslichen
Feststoffen haben, müssen für den bakteriologischen Keimnachweis
vorfiltriert werden. Der Vorfiltrationsaufsatz aus Edelstahl (16807)
ermöglicht die Durchführung der Vorfiltration zusammen mit der
eigentlichen Membranfiltration in einem Arbeitsgang. Er wird
zwischen Edelstahltrichter und Unterteil aufgesetzt, vollständig mit
sterilem Wasser gefüllt (um zu vermeiden, dass eingeschlossene Luft
die Filtration behindert) und mit einem bakteriologischen Vorfilter
11301-050 (8 μm Porengröße) bestückt. Grobe Bestandteile in der
zu prüfenden Probe werden auf diesem Vorfilter zurückgehalten,
so dass das auf der Edelstahlfritte liegende Membranfilter entlastet
wird und die Kolonien ungehindert durch störende Ablagerungen
anwachsen können.
Der Vorfiltrationsaufsatz ist ebenfalls abflammbar.
3. Reinigen und Pflegen des Edelstahlgerätes
Um eine lange Lebensdauer und Funktionstüchtigkeit zu gewähr-
leisten, ist es notwendig, die Geräte vor dem ersten Gebrauch und
nach jeder Filtration zu reinigen.
Hierbei gehen Sie wie folgt vor:
1. Schrauben Sie die weiße Verschlusskupplung von dem Edelstahl-
bogen ab.
2. Säubern Sie alle Teile mit warmem Wasser und schonendem
handelsüblichen Laborreinigungsmitteln (für Metall, Glas, Kunst-
stoff) und weichen Bürsten.
3. Spülen Sie die Teile mit heißem Wasser und danach mit destil-
liertem Wasser ab. Eine zusätzliche Spülung mit 70%igem
Alkohol beschleunigt den Trocknungsvorgang.
4. Trocknen Sie die Teile im Trockenschrank. Bitte verwenden Sie
zum Trocknen keine Tücher wegen etwaiger Faserabgabe an das
Gerät.
4. Technische Daten:
Material: Edelstahl Rundbogen: Werkstoff 1.4301
(B.S. 304S31/AlSl 304)
Verschlusskupplung: PVDF
Basisunterstützung für Membranfilter Durchmesser 47 mm
Max. Betriebsdruck: Vakuum max. 2 bar Überdruck
Autoklavieren: max. 134 °C, 30 min
Trockenhitze: max. 180 °C, 30 min
1. Aufbau des Combi.jet Systems
Bauen Sie die e.jet Transfer Pumpe entsprechend der Bedienungs-
anleitung auf und bestücken diese mit einem Schlauch für den
Abfluss des Filtrats (beachten Sie hierbei die durch die Pfeilrichtung
auf dem schwarzen Pumpenkopf angezeigte Flussrichtung!).
Verbinden Sie nun den Ausgang der Combi.jet durch einfaches
Aufstecken der weißen Verschlusskupplung auf die Olive der
Microsart®e.jet Pumpe (166MP-3).
2. Filtration
Edelstahlhähne an den Unterteilen ermöglichen das unabhängige
Ein- oder Ausschalten des Vakuums für jeden einzelnen Filtrations-
aufsatz und minimieren so das Risiko von sekundären Kontamina-
tionen. Die als Filterunterstützung dienenden Edelstahlfritten
gewährleisten eine gleichmäßige Verteilung der Rückstände bzw.
Keime auf der Membranfilteroberfläche.
2.1 Alle proben- und filtermembranberührten Teile des Systems
müssen steril sein. Dafür gibt es je nach Material verschiedene
Möglichkeiten:
a) Autoklavieren (Edelstahl, Glas und Polycarbonat): Setzen Sie die
Geräte so zusammen, dass eine Filtermembran sicher zwischen
Unterteil und Trichter eingeklemmt ist. Bedenken Sie dabei,
dass das Filter nicht so fest geklemmt sein darf, dass kein Dampf
an die Klemmung gelangen kann.
Stellen Sie den 2-Wege-Hahn auf „6 Uhr“. Decken Sie Ein- und
Ausgänge mit Alufolie ab und autoklavieren Sie gemäß den Techni-
schen Daten der Systemkomponenten. Nach der Sterilisation setzen
Sie das System fest zusammen und verbinden es mit den anderen
Systemkomponenten.
Stellen Sie den 2-Wege-Hahn auf „9 Uhr“.
a) Abflammen (nur Edelstahl): Es erspart lange Wartezeiten
zwischen den einzelnen Filtrationen und ist im folgenden Text
ausführlich beschrieben.
2.2 Reinigen Sie ihren Labortisch und desinfizieren Sie mit Alkohol
oder einem handelsüblichen Desinfektionsmittel.
2.3 Reihen Sie ihre sterilen Nährmedien auf, z.B. Nährkarton-
scheiben in Petrischalen oder alternativ Agar in Petrischalen.
Die Nährkartonscheiben sind mit 3.0–3.5 ml sterilem destillier-
ten oder demineralisiertem Wasser zu befeuchten. Hierfür emp-
fehlen wir unsere Dosierspritze (16685-2) mit aufgesetztem
sterilen Minisart®(17597-K).
2.4 Neben das autoklavierte Filtrationsgerät stellen Sie einen
Bunsenbrenner sowie ein Glas mit etwas Alkohol und einer
Pinzette darin.
a) Legen Sie sich die steril verpackten Membranfilter in gut
erreichbare Nähe.
b) Schalten Sie die e.jet Transfer Pumpe ein und nehmen Sie den
Trichter ab.
c) Mit dem Bunsenbrenner flammen Sie die Edelstahlfritte ab.
Öffnen Sie dabei den Hahn („6 Uhr“) und ziehen Sie die Flamme
mittels Vakuum durch die Fritte. Danach schließen Sie den Hahn
wieder („9 Uhr“).
d) Setzen Sie den Trichter wieder auf das Unterteil.
e) Um die Abkühlung des Filtergerätes zu beschleunigen und das
Einlegen des Membranfilters zu vereinfachen, spülen Sie das
Gerät mit sterilem Wasser (z.B. mit Hilfe einer Dosierspritze
und einem aufgesetzten sterilen Minisart®). Zum Absaugen
des Wassers den Hahn öffnen („6 Uhr“) und wieder schließen
(„9 Uhr“).
f) Sterilisieren Sie die Pinzette kurz in der Flamme und entnehmen
Sie das sterile Membranfilter (gegebenenfalls mit gelben
Schutzblättchen) der Verpackung. Nehmen Sie mit einer Hand
den Trichter vom Geräteunterteil ab und legen Sie das Mem-
branfilter (mit dem Gitternetz bzw. gelben Schutzblättchen
nach oben zeigend) zentrisch auf die Fritte.
g) Sollte das Membranfilter mit einem gelben Schutzblättchen
versehen sein, entfernen Sie dieses bevor das Gerät mit dem
Oberteil oder Trichter zusammengesetzt wird. Setzen Sie den
Trichter wieder auf das Geräteunterteil.
Typischer Aufbau: Microsart®e.jet Pumpe (166MP-3) mit Combi.jet Leiste (16847-CJ) und installierten 100 ml Edelstahltrichtern